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- 武漢漢協(xié)泰科技有限公司
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[聯(lián)系地址]:湖北省武漢市江漢區(qū)唐家墩街新天門(mén)墩5號(hào)6棟2單元1103室
[聯(lián) 系 人]:譚道書(shū)
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供應(yīng)global DMSO Blastocyst玻璃化冷凍套裝
發(fā)布時(shí)間:2010/12/27 11:28:00 瀏覽次數(shù):1261- 基本信息
- 產(chǎn)品類(lèi)型: 其它
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): 通過(guò)美國(guó)和歐洲相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
零售價(jià)格: 電議
供貨價(jià)格:
詳情介紹
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global DMSO Blastocyst玻璃化冷凍套裝
·2瓶1ml 平衡液,包含DMSO、乙二醇和10mg/ml的HSA,使用 global® w/HEPES緩沖液。
·2瓶1ml 玻璃化冷凍液,包含DMSO、乙二醇、蔗糖和10mg/ml的HSA,使用 global® w/HEPES緩沖液。
·4個(gè)SunIVF embryo GPS® 操作皿,產(chǎn)品經(jīng)過(guò)無(wú)菌、內(nèi)毒素和MEA檢測(cè)。
global® DMSO 胚泡玻璃化冷凍規(guī)程
使用說(shuō)明
1.玻璃化冷凍操作應(yīng)該在室溫(20-27°C)下進(jìn)行。使用前把平衡液和玻璃化冷凍液放置在室溫下。以下操作步驟不要使用顯微加熱臺(tái)。在標(biāo)本在平衡液和玻璃化冷凍液中時(shí)盡量減少標(biāo)本見(jiàn)光。
2.用液氮填充液氮貯存器到足夠的深度,深度必須能淹沒(méi)Cryocane上的凍存管(杯),將液氮貯存器放置于顯微鏡邊附近。將凍存管(杯)固定于Cryocane的底端并淹沒(méi)在液氮中,為玻璃化冷凍標(biāo)本做準(zhǔn)備。
3.確定需要做玻璃化冷凍的胚胎?偸沁x擇好質(zhì)量的胚泡用于玻璃化冷凍。
4.在將要使用的培養(yǎng)皿和運(yùn)輸/存儲(chǔ)設(shè)備上標(biāo)注必要的信息。
5.在使用前,輕輕正反搖動(dòng)幾次以確保每瓶的平衡液和玻璃化冷凍液充分混勻。
6.在無(wú)菌條件下,用移液管注入20μl平衡液到GPS® 胚胎操作皿中,見(jiàn)圖1。
7.從培養(yǎng)箱中取出帶有胚泡的培養(yǎng)皿并檢查胚胎的質(zhì)量。
8.小心地轉(zhuǎn)移胚泡(一次不得超過(guò)兩個(gè))到平衡液滴頂部并開(kāi)始計(jì)時(shí),盡量減少帶出的培養(yǎng)液(或保存液)。胚泡需要在自由降落過(guò)程中在平衡液中平衡5~15分鐘。胚泡會(huì)縮小然后逐漸重新擴(kuò)張到原來(lái)的大小,這表明平衡過(guò)程完成。
9.當(dāng)胚泡在平衡液中平衡時(shí),分別取4滴20μl玻璃化冷凍液到GPS® 胚胎操作皿中(VS1, VS2, VS3, VS4) ,見(jiàn)圖1。
注意:以下步驟(10-15)必須在90~110*以?xún)?nèi)完成。
10.在平衡液中的平衡過(guò)程完成以后,吸取少許玻璃化冷凍液進(jìn)入移液管并且轉(zhuǎn)移胚泡到滴玻璃化冷凍液滴(VS1)的中央,并且握持5*鐘。
11.從VS1中快速轉(zhuǎn)移胚泡到第二滴玻璃化冷凍液滴(VS2)的中央,并且握持5*鐘。
12.從VS2中快速轉(zhuǎn)移胚泡到第三滴玻璃化冷凍液滴(VS3)的中央,并且握持10*鐘。
13.后,從VS3中快速轉(zhuǎn)移胚泡到第四滴玻璃化冷凍液滴(VS4)的底部。
14.關(guān)于玻璃化冷凍的步驟,需遵照玻璃化冷凍載體的說(shuō)明。小心地將胚泡從VS4中轉(zhuǎn)移到玻璃化冷凍載體中,然后進(jìn)行冷凍載體說(shuō)明規(guī)定的操作。
15.提示:從把胚泡放置到VS1到浸入到液氮中的總時(shí)間不應(yīng)該超過(guò)已經(jīng)確定的此步驟的優(yōu)化時(shí)間,當(dāng)然也不應(yīng)該超過(guò)100*鐘。
16.存儲(chǔ)到液氮中:(執(zhí)行**這些步驟是,都必須確保玻璃化的樣品充分浸在液氮中,以防止不可逆的解凍)。轉(zhuǎn)移玻璃化的樣品進(jìn)入已經(jīng)標(biāo)寫(xiě)好的并且固定在Cryocane上的凍存管(杯)上,用另一個(gè)凍存管(杯)倒置扣在其頂部當(dāng)作蓋子用,然后把Cryocane轉(zhuǎn)移到液氮罐中。
17.如果需要玻璃化冷凍更多的胚泡,重復(fù)上述4~16步驟,需要使用新的GPS® 胚胎操作皿以及新鮮的平衡液和玻璃化冷凍液。
聯(lián)系方式
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聯(lián) 系 人: 譚道書(shū)
聯(lián)系地址: 湖北省武漢市江漢區(qū)唐家墩街新天門(mén)墩5號(hào)6棟2單元1103室
電 話: 0571-85885083