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供應global DMSO Blastocyst玻璃化冷凍套裝
發(fā)布時間：2010/12/27 11:28:00 瀏覽次數：1249- 基本信息
- 產品類型： 其它
質量標準： 通過美國和歐洲相關標準
零售價格： 電議
供貨價格：
詳情介紹
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global DMSO Blastocyst玻璃化冷凍套裝
·2瓶1ml 平衡液，包含DMSO、乙二醇和10mg/ml的HSA，使用 global® w/HEPES緩沖液。
·2瓶1ml 玻璃化冷凍液，包含DMSO、乙二醇、蔗糖和10mg/ml的HSA，使用 global® w/HEPES緩沖液。
·4個SunIVF embryo GPS® 操作皿，產品經過無菌、內毒素和MEA檢測。
global® DMSO 胚泡玻璃化冷凍規(guī)程
使用說明
1.玻璃化冷凍操作應該在室溫（20-27°C）下進行。使用前把平衡液和玻璃化冷凍液放置在室溫下。以下操作步驟不要使用顯微加熱臺。在標本在平衡液和玻璃化冷凍液中時盡量減少標本見光。
2.用液氮填充液氮貯存器到足夠的深度，深度必須能淹沒Cryocane上的凍存管（杯），將液氮貯存器放置于顯微鏡邊附近。將凍存管（杯）固定于Cryocane的底端并淹沒在液氮中，為玻璃化冷凍標本做準備。
3.確定需要做玻璃化冷凍的胚胎。總是選擇好質量的胚泡用于玻璃化冷凍。
4.在將要使用的培養(yǎng)皿和運輸/存儲設備上標注必要的信息。
5.在使用前，輕輕正反搖動幾次以確保每瓶的平衡液和玻璃化冷凍液充分混勻。
6.在無菌條件下，用移液管注入20μl平衡液到GPS® 胚胎操作皿中，見圖1。
7.從培養(yǎng)箱中取出帶有胚泡的培養(yǎng)皿并檢查胚胎的質量。
8.小心地轉移胚泡（一次不得超過兩個）到平衡液滴頂部并開始計時，盡量減少帶出的培養(yǎng)液（或保存液）。胚泡需要在自由降落過程中在平衡液中平衡5~15分鐘。胚泡會縮小然后逐漸重新擴張到原來的大小，這表明平衡過程完成。
9.當胚泡在平衡液中平衡時，分別取4滴20μl玻璃化冷凍液到GPS® 胚胎操作皿中(VS1, VS2, VS3, VS4) ，見圖1。
注意：以下步驟（10-15）必須在90~110*以內完成。
10.在平衡液中的平衡過程完成以后，吸取少許玻璃化冷凍液進入移液管并且轉移胚泡到滴玻璃化冷凍液滴(VS1)的中央，并且握持5*鐘。
11.從VS1中快速轉移胚泡到第二滴玻璃化冷凍液滴(VS2)的中央，并且握持5*鐘。
12.從VS2中快速轉移胚泡到第三滴玻璃化冷凍液滴(VS3)的中央，并且握持10*鐘。
13.后，從VS3中快速轉移胚泡到第四滴玻璃化冷凍液滴(VS4)的底部。
14.關于玻璃化冷凍的步驟，需遵照玻璃化冷凍載體的說明。小心地將胚泡從VS4中轉移到玻璃化冷凍載體中，然后進行冷凍載體說明規(guī)定的操作。
15.提示：從把胚泡放置到VS1到浸入到液氮中的總時間不應該超過已經確定的此步驟的優(yōu)化時間，當然也不應該超過100*鐘。
16.存儲到液氮中：（執(zhí)行**這些步驟是，都必須確保玻璃化的樣品充分浸在液氮中，以防止不可逆的解凍）。轉移玻璃化的樣品進入已經標寫好的并且固定在Cryocane上的凍存管（杯）上，用另一個凍存管（杯）倒置扣在其頂部當作蓋子用，然后把Cryocane轉移到液氮罐中。
17.如果需要玻璃化冷凍更多的胚泡，重復上述4~16步驟，需要使用新的GPS® 胚胎操作皿以及新鮮的平衡液和玻璃化冷凍液。
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