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- 武漢漢協(xié)泰科技有限公司
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[聯(lián)系地址]：湖北省武漢市江漢區(qū)唐家墩街新天門墩5號(hào)6棟2單元1103室
[聯(lián) 系 人]：譚道書
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供應(yīng)global DMSO Blastocyst 玻璃化冷凍復(fù)溫套裝
發(fā)布時(shí)間：2010/12/27 11:26:00 瀏覽次數(shù)：1380- 基本信息
- 產(chǎn)品類型： 其它
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)： 通過美國和歐洲相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
零售價(jià)格： 電議
供貨價(jià)格：
詳情介紹
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global® DMSO Blastocyst 玻璃化冷凍復(fù)溫套裝
·1瓶1ml解凍液1，包含蔗糖和10mg/ml的HSA，使用 global® w/HEPES緩沖液。
·1瓶1ml解凍液2，包含蔗糖和10mg/ml的HSA，使用 global® w/HEPES緩沖液。
·1瓶1ml解凍液3，包含10mg/ml的HSA，使用 global® w/HEPES緩沖液。
·4個(gè)SunIVF embryo GPS® 操作皿，產(chǎn)品經(jīng)過無菌、內(nèi)毒素和MEA檢測。
使用說明
1.再水合過程應(yīng)該在20-27°C下進(jìn)行。
2.在培養(yǎng)設(shè)備中孵化時(shí)盡量減少標(biāo)本見光。
3.在使用 global® DMSO Blastocyst玻璃化冷凍復(fù)溫套裝(解凍液1, 解凍液2 and 解凍液3)之前，將其升溫至20-27°C。
4.參閱玻璃化冷凍載體生產(chǎn)商關(guān)于所使用載體的使用說明。
5.用液氮填充液氮貯存器到足夠的深度，深度必須能完全淹沒裝有載體的凍存管（杯），將液氮貯存器放置于包含有要解凍的玻璃化樣品的液氮罐附近。
6.將載體從Cryocane和凍存管（杯）中取出并且快速轉(zhuǎn)移到裝有液氮的液氮貯存器中，保持載體始終浸在液氮中。
7.把液氮貯存器放置于顯微鏡附近，以方便快速操作。
8.在SunIVF embryo GPS® 操作皿上標(biāo)記**必要的信息。
9.使用前，把每瓶解凍液1、解凍液2、解凍液3 輕輕正反搖動(dòng)幾次將其搖勻。
10.在無菌條件下，轉(zhuǎn)移20 μl 解凍液1到SunIVF embryo GPS®（W1a）中，見圖2。
11.轉(zhuǎn)移兩滴20 μl 解凍液2到SunIVF embryo GPS®（W2a & W2b）中，見圖2。
復(fù)溫和再水合
12.用鑷子找到液氮存儲(chǔ)器內(nèi)凍存管（杯）中的載體，此時(shí)只有處理一個(gè)載體。
13.小心載體從凍存管（杯）中取出，保持裝有胚泡的部分在液氮液面以下。
14.遵照載體的使用說明進(jìn)行復(fù)溫和打開載體，然后立即轉(zhuǎn)移載體中的內(nèi)容物（約1μl）到embryo GPS® 操作皿中，見圖2。防止轉(zhuǎn)移內(nèi)容物時(shí)形成泡泡。
15.從W1a中取大約1μl 溶液并轉(zhuǎn)移到包含胚泡的液滴旁邊，見圖2（W1b）。
16.使用玻璃化冷凍用具融合兩個(gè)液滴，讓兩者逐漸混合一分鐘。
17.從W1a中取少量溶液到移液管中，然后使用它從W1b拾起胚泡并轉(zhuǎn)移到W1a的底部。
18.在W1a中握持胚泡1分鐘。胚泡將縮小并浮在液滴的頂部。
19.提示：在下面的步驟中，每次轉(zhuǎn)移胚胎以后，進(jìn)行下一操作之前，都要排出**移液管中的液體并從下一滴溶液中吸取一些溶液。在轉(zhuǎn)移過程中要避免產(chǎn)生泡泡。
20.將胚泡從W1a中轉(zhuǎn)移到W2a底部。
21.將胚泡在W2a中握持2分鐘。
22.將胚泡從W2a中轉(zhuǎn)移到W2b底部。
23.將胚泡在W2b中握持2分鐘。
24.提示：胚泡在W2a和W2b中仍然保持縮小的狀態(tài)。
25.在W2b的握持時(shí)間內(nèi)，轉(zhuǎn)移三個(gè)20μl的解凍液3到embryo GPS® 操作皿中，見圖2（W3a, W3b & W3c）。
26.將胚泡從W2b中轉(zhuǎn)移到W3a底部。
27.將胚泡在W3a中握持3分鐘。
28.將胚泡從W3a中轉(zhuǎn)移到W3b頂部。
29.將胚泡在W3b中握持3分鐘。
30.將胚泡從W3b中轉(zhuǎn)移到W3c頂部。
31.將胚泡在W3c中握持3分鐘。
32.后，將胚泡轉(zhuǎn)移到一個(gè)已經(jīng)裝有預(yù)先平衡過的合適的培養(yǎng)基的embryo GPS® 操作皿中，并且在CO2培養(yǎng)箱37°C培養(yǎng)3~4小時(shí)，以便在胚胎移植前做進(jìn)一步的操作。
如果需要解凍更多的胚泡，重復(fù)上述8~22步驟，需要使用新的GPS® 胚胎操作皿以及新鮮的平衡液和玻璃化冷凍液。
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